0513菌種保存預備動作：接種至液體 MRS

　　預計明天要做菌種保存，所以先準備好滅菌的微量離心管和甘油。還要將九宮格三重複中的其中一盤拿來接種在液體 MRS 中，放入培養箱 35℃ 培養，明天才可以菌種保存。

將菌種接種到液體 MRS 中

0513配置 0.85 % 之生理食鹽水

　　之前抑菌實驗沒有事先配好的生理食鹽水，今天趕緊來配置。

據說這罐要價 1000 多，一般是不用這麼好，
但總量也只要 8.5 g ，我們就用這個來配了。

0513點菌後實驗：鏡檢以及觸媒測試

　　上次點在九宮格的菌，今天要做後續實驗，原本有 17 個樣本，扣除 4 個劃菌之後都沒長，放置 35℃ 培養箱到今天仍沒有長菌（有的沒長菌；有的只長黴菌；而 Ta6 這個樣本則有奇怪的現象，待會會講到。）

僅剩的樣本

0513抑菌實驗結果

 　　上次做的抑菌實驗結果出爐了，隔這麼久今天才有機會拍照，據老師指出，第一批篩選出來的乳酸菌共 54 株，其中大於 50% 都可以明顯觀察出具有抑菌效果，但！我們不曉得其中重複了多少菌種。之前的實驗操作步驟請參考「0507乳酸菌抑制 E. coli K12 實驗」。

有看到抑菌圈嗎？

0507乳酸菌抑制 E. coli K12 實驗

　　之前活化的菌種要做抑制測試了！活化菌種請看「0429活化菌種」。而 5/1 學妹有將 MRS 中的菌種接種到 m-MLB 培養基上，每盤接 4 菌種。

　　接種裝置如照片，將培養基放在中間，吸取 15 μL 的菌液，將 tips 拔起，放在上方黑圈內，再將上方那層往下壓，到碰觸培養基即可。

　　在無菌台放過夜（23℃），然後在 25℃ 培養。今日測試與 E. coli 的抑制反應。

編號：左1、下2、右3、上4

0507馬祖樣本點九宮格

　　劃菌培養好後，就是要來挑菌了，挑選的菌落點在 MRS agar，一樣也做三重複，便於後續實驗（雙氧水測試、牛乳培養、MRS 培養）。
　　從之前劃菌的三重複中，由外觀、大小、顏色挑選菌落，例如觀測只有兩種，便挑三到四顆菌，並記錄肉眼觀察之描述。

0507效能測試：超音波洗淨機

　　效能測試 a.k.a. 玩樂時間！
　　怎麼測試勒？
　　就是把大家的眼鏡放進去清洗，看看洗 3~5 分鐘之後，眼鏡會變多乾淨！

0502實驗試劑筆記

　　今天看到的試劑，是之後會用到的。拍照，先做個筆記，以免忘記。
　　有黃麴毒素、磺胺、膽鹽。

0502實驗：檢測水中大腸桿菌群及大腸桿菌

　　下週學弟妹們要做實驗，檢測水中大腸桿菌群及大腸桿菌，所以今天老師稍微示範一次操作方式讓我們了解。
　　我們將採用「玻璃過濾瓶組」搭配「Gn-6 濾膜」（孔徑 0.45 μm）和「水流抽氣器」（KS-1 aspirator）來做實驗，，下圖為組裝起來後的樣子。

0502配置 70% 酒精

　　實驗室的酒精快要用完了！
　　依照江老師的簡單三步驟，立刻配置 70% 的酒精！

步驟一：將 95% 的酒精加至血清瓶
步驟二：加入蒸餾水
步驟三：搖晃

完成！

0430馬祖樣本劃菌

　　做好 MRS agar 後的工作，就是要將江老師從馬祖拿回來的樣本進行「劃菌」，如此一來才可以分離出單一菌落，便於之後挑菌的動作。
　　這些是一些江老師採集的樣本，已將樣本浸泡於 MRS 中使各種細菌生長，在 4/25 時已經鏡檢確定其中有細菌，故我們打算將馬祖的 17 個樣本都劃菌。（圖為使用電子目鏡搭配軟體 GUVCViewer 拍照）

鏡檢結果顯示有細菌(樣本為Tc5)

樣本

0430配置 MRS agar 之方法

今日實驗記錄

「配製」

準備2樣粉末：

*MRS－－比例為 55g in 1L

　　　　 我們要配置  700 mL*4瓶，故要 55g*0.7*4 = 154g

*Agar－－要 1.5%（1L 要有 15g）

　　　　 所以每瓶( 0.7L )要加 0.7*15g = 10.5g（要準備10.5g*4）

0429活化菌種

　　活化菌種以便於之後的實驗（抑制測試及耐膽鹽測試等等）。

準備動作
* 開啟無菌操作台 UV 15min
* 7 mL MRS（一菌種一管）

0213開箱照：酸鹼度測試儀

　　江老師買的兩台好攜帶的 pH 測試儀到了，就讓我來開箱吧！

 

0212樣本加工：醃製蔬果

　　要篩選乳酸菌之前要先製造出乳酸菌！所以江老師採集了許多蔬果來醃製，有些是直接加入 2% 的鹽巴，直接混勻使出水（如宜蘭蔥、大頭菜）；有些是加入 2% 的鹽水，使食材浸泡在其中（如草莓、葡萄）；有些是加入鹽巴以及砂糖，這也是老師幾年前的作法（如金棗、大白菜）。