0430馬祖樣本劃菌

　　做好 MRS agar 後的工作，就是要將江老師從馬祖拿回來的樣本進行「劃菌」，如此一來才可以分離出單一菌落，便於之後挑菌的動作。
　　這些是一些江老師採集的樣本，已將樣本浸泡於 MRS 中使各種細菌生長，在 4/25 時已經鏡檢確定其中有細菌，故我們打算將馬祖的 17 個樣本都劃菌。（圖為使用電子目鏡搭配軟體 GUVCViewer 拍照）

鏡檢結果顯示有細菌(樣本為Tc5)

樣本

準備動作：

* 開啟無菌操作台 UV 15min

* 準備好以下物品

劃菌要準備的物品：

1、接種環（Loop）

2、MRS agar 培養基（一種樣本三重複，故要準備 17*3 = 51 碟）

3、小台瓦斯爐（確認是否有瓦斯）

4、點火槍

5、pipette（2~20 μL）

6、滅菌過的 tips

7、小燒杯當垃圾桶丟 tips

8、多色奇異筆用於標示

9、樣本

實驗步驟：

1、準備好後噴過酒精，拿進無菌操作台

2、將三重複的培養基寫上日期、樣本編號及 a、b、c 代表三重複（如：4/30 Tc5 a）

3、將樣本搖晃均勻後（最好搖起底部沉澱物），各滴 10 μL 到三個培養基上

4、培養基翻面，方面劃菌。將 Loop 用火燒紅後，在不用劃線的地方燙一下使降溫

5、從菌液開始向外拉四條線

6、燒紅 Loop、燙一下降溫，將培養基轉 90 度後，由上步驟的四條線再拉出四條線

7、同上步驟（劃幾條線、轉幾次都因人而異，可視菌液濃度做增減。）

8、直接開始劃第二盤培養基

9、重複步驟 5 ~ 8 ，劃完三盤

10、完成劃菌的培養基一同放入塑膠箱，緊蓋後，點蠟燭消耗箱中的氧氣

11、室溫培養至菌落生長到可挑菌的狀態（預計培養一週後進行挑菌）

以下為劃線示意圖：

此實驗之相關文件：
［201404馬祖樣本實驗共編筆記連結，非共用者無法觀看］